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提rna时用成无水乙醇 |
酵母rna提取为什么加入乙醇,乙醇可以沉淀rna吗
(5)5%(v/v)接种至100ml添加有5%,8%,10%(v/v)乙醇的ypd培养基(10g/l酵母浸粉,20g/l蛋白胨,100g/l葡萄糖)中,30℃,150rpm培养。5%和8%乙醇条件下培养12小时,10%乙醇条件下培养24小时,目的是去除脂溶性物质和水,乙醚的沸点比乙醇的低,所以最后加乙醚有利于沉淀的干燥。二)RNA的鉴定取沉淀约1g,加10ml10%H2SO4→沸水浴中加热30min。•(5).嘌呤碱取水
⊙﹏⊙ 1. 酵母RNA提取的原理:(1) 酵母核酸中RNA含量较多,DNA则少与2% (2) RNA可溶于碱性溶液,当碱被中和后,可加入乙醇使其沉淀,由此可制得粗RNA制品。3) 用碱提取的RNA有不同程4.影响提取的因素:溶液PH 值,溶剂的极性和离子强度,温度,水解酶,搅拌,金属离子,抽提液与抽提物的比例要适当,一般5:1。5.酵母RNA 的提取方法:苯酚法—保存
1.酵母RNA提取:(1)称4g干酵母粉置于100ml烧杯中,加入40ml0.2%氢氧化钠溶液,沸水浴上加热30分钟,不断搅拌。2)加入数滴乙酸溶液使提取液呈酸性,4000r/min,离组织匀浆用苯酚处理并离心后,RNA即溶于上层被酚饱和的水相中,DNA和蛋白质则留在酚层中,向水层加入乙醇后,RNA即以白色絮状沉淀析出,此法能较好地除去DNA和蛋白质。上述方法提取的RNA具有生物活性。
6.样品应避免反复冻融,否则会影响RNA提取的的量和质量。对于有些细胞壁较厚以及在培养阶段会产生大量代谢物的酵母,最好在生长的早期就收集样品。7.第一次使用前应按照试剂瓶摘要:【目的】提高酿酒酵母的高耐温性,从而提高菌株在高温下的乙醇发酵性能。【方法】利用染色体整合过表达酿酒酵母液泡蛋白酶B编码基因PRB1。【结果】在41 °C高温条件下进行乙醇
酵母中富含的核糖核酸在碱处理下成为可溶性的钠盐与蛋白质等其它成分分开,然后用乙醇提取。加酸水解核酸,分解为磷酸、戊糖和碱基,用于可鉴定其组成成分。bamboopiggy 2022-01、RNA不溶于有机溶剂乙醇2、乙醇可溶解其他水溶性杂质3、乙醇易挥发便于干燥
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标签: 乙醇可以沉淀rna吗
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