pcr假阳性出现的各种原因,PCR假阳性的解决方法

pcr扩增实验报告结果分析 2023-12-21 21:32 569 墨鱼

pcr扩增实验报告结果分析

pcr假阳性出现的各种原因,PCR假阳性的解决方法

扩增产物累积后开盖极易扩散到空气中形成气溶胶污染，极微量的PCR产物污染，就能使扩增假阳性。但也会导致送检标本病毒密度大幅下降，进而导致检测精度大幅下降，从而可能使得部分阳性被检测成阴性。

扩增反应，最后再进行终点定性检测(图9.4),从而实现对多个靶标的区分和鉴别，该方法可有效的避免各核苷酸链之间形成二聚体甚至多聚体所导致非特异性扩增的出现，扩增效率下降，检测灵3.扩增产物污染：大量拷贝的产物泄漏或扩增后的PCR反应管意外开盖，这是PCR反应中最主要、最常见的污染问题。因为PCR产物拷贝量大，远远高于PCR检测数个拷贝的极限，所以极微量的PCR产

二是空气中的小片段核酸污染，这些小片段比靶序列短，但有一定的同源性。可互相拼接，与引物互补后，可扩增出PCR产物，而导致假阳性的产生，可用巢式PCR方法来减轻或消除。3. 基因组出现非特异性扩增带物理原因：变性对PCR扩增来说相当重要，如变性温度低，变性时间短，极有可能出现假阴性；退火温度过低，可致非特异性扩增而降低特异性扩增效率退火温度过高影响引物与模板的结

科研民工搬砖日日常科研废物但也不忘记学习#pcr #科研学习#实验室#科研狗日常PCR拖尾及假阳性的原因及对策拖尾现象：产物在凝胶上呈Smear状态。原因：1.模板不纯2.Buffer不合适3.退火温度偏低4.酶量过多5.dNTP、Mg2+浓度偏高6.循环

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标签： PCR假阳性的解决方法