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氯仿抽提rna步骤 |
提rna 乙醇没晾干,氯仿抽提rna替代
可适当加入RNA 保护因子(货号:51090,一般50μLRNA 溶液加入2μL)。2. 2.裂解液含有刺激性化学物质,操作过程请做好防护措施,避免直接接触皮肤,防止吸入口鼻,洗涤液在使用前应加我们研究所里提RNA用的枪头和EP管都是高压两遍的,没有用DEPC水处理。1、有灭菌过的DEPC水,这一般是用来配75%乙醇用,因为乙醇若高压灭菌会挥发,所以乙醇是新开封专用的。2、
我在RNA抽提最后一步里没有完全晾干乙醇,底下还有一点乙醇的时候我就加DEPC水溶解了,请问这样会不会影响下面的RT-PCR阿?还有,我做了3次RT-PCR后电泳都没有一点条带,RNA的浓直接高压烘干即可。如果用0.1%DEPC处理,要在DEPC配置后振摇1小时后再浸泡枪头,EP管方有效。我做的都是将枪头泡在配制好的depc中,摇振过夜,然后倒掉depc注意要到干净,再
是不是吹起用力过猛到盖子上了,我洗完偶尔也会有这种情况,12000离10min又可以看到沉淀了。还有乙醇离心后最好不要直接倒掉上清,我一般是用*小心的吸,然后管口具体原因如下:1、乙醇浓度不够:RNA提取需要使用70%乙醇。如果使用的乙醇浓度不够,可能导致RNA干燥速度缓慢。2、样品中含有大量盐类:如果样品中含有盐类,会降
加入后把管子敲一敲,尽量使RNA沉淀飘起来,每使用1ml Trizol至少加1ml乙醇。有时,为避免RNA被洗掉,此步可以省掉,洗涤之后可以晾干或者烤干乙醇,但是不能过于干燥,否则不易溶解。10)4RNA是溶在水相中,你用75%的乙醇洗,肯定都没了。你应该用异丙醇沉淀回收RNA。乙醇沉淀是DNA。2011-
10、最后晾干乙醇时应尽量充分晾干,先用枪头尽量把75%乙醇吸干,再晾5min,否则没有晾干乙醇,加入DEPC水时可能导致RNA白色沉淀不溶解。11、加入DEPC水溶解RNA时,可根据自己需要的浓①样品细胞或组织的有效破碎;②有效地使核蛋白复合体变性解离,释放出RNA;③对RNA 酶的有效抑制;④
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