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酵母rna分离过程碱液作用,为什么要用酵母提取RNA

酵母rna的提取方法 2023-08-15 10:23 686 墨鱼
酵母rna的提取方法

酵母rna分离过程碱液作用,为什么要用酵母提取RNA

(^人^) 较小RNA透出细胞外,然后用酸中和,除去蛋白质和菌体后的上清液用乙醇沉淀RNA。提取的RNA有不同程度的降解。稀碱法的提取时间短,提取率高于浓盐法,更利于工业化生产。(二)实验材料的选择•酵酵母rna的分离实验碱液作用:pH5~6为大多数氨基酸的等电点,调pH可以沉淀原有的和碱性条件下水解少量蛋白质产生的

本实验介绍了从酵母中分离制备蛋白质和RNA 的原理和方法。实验原理酵母细胞富含蛋白质和核酸。用稀碱液(0.2% 的氢氧化钠)处理酵母使细胞裂解,离心收集上清同时细胞壁的聚糖成分在碱液中会部分水解,蛋白质(包括多种酶类)也会发生变性,从而增加酵母细胞的通透性,酵母细胞原生质膜失去选择透过性,细胞就破裂使RNA 流出。4.核酸

实验原理酵母细胞富含蛋白质和核酸。用稀碱液(0.2% 的氢氧化钠)处理酵母使细胞裂解,离心收集上清液,得到酵母核蛋白抽提液。用盐酸调节抽提液pH 至3.0 (核蛋白的等电点),核蛋白溶解度下降大量沉酵母核酸中RNA的含量较多,DNA则少于2%。RNA可溶于碱性溶液,当碱液被中和后,可加乙醇使其沉淀,由此即可得到粗RNA粗品。2.RNA的鉴定目前测定核酸含量的方法主要有以下四种:定磷法(R

但是用碱液提取的RNA有不同的降解。RNA含有核糖、嘌呤碱、嘧啶碱和磷酸等组分,加入硫酸煮沸可使其水解,从水解液中可以测出上述组分的存在(见实验内容) 三、实1.酵母核酸中RNA含量较多,DNA含量则少于2%。2.RNA可溶于碱性溶液,当碱被中和后,可加乙醇使其沉淀,有此可得粗RNA制品。3.用碱液提取的RNA有不同程度的降解三、实验仪器1

二、实验原理酵母核酸中RNA含量较多,DNA含量则少于2%。RNA可溶于碱性溶液,当碱被中和后,可加乙醇使其沉淀,有此可得粗RNA制品。用碱液提取的RNA有不同程度的降(7) 蒸馏过程中,加碱液后要迅速关闭进样口,防止反应放出的氨气逸出。8) 蒸馏过程中,火焰的温度要适当,太小加热过慢,太大容易导致溶液暴沸甚至从进气口溢出。9) 蒸馏过程中,用硼

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