pcr阴性对照老是出现假阳性,pcr假阴性假阳性

pcr阴性对照老是出现假阳性,pcr假阴性假阳性

过于灵敏反而容易污染，PCR的实验结果也容易被各种无关的外源性DNA或RNA所干扰，极其微量的污染也能扩增后被检出，即在本不该出现荧光信号的阴性样本、阴性对照(生理盐水)或空白对照中扩增中出现假阳性和假阴性的原因较少，主要是试剂污染或扩增管污染而造成的假阳性。出现假阴性的主要原因是引物设计不佳，或引物含量较低；另一方面可能是扩增仪

1、阳性对照：在建立PCR反应实验室及一般的检验单位都应设有PCR阳性对照，它是PCR反应是否成功、产物条带位置及大小是否合乎理论要求的一个重要的参考标志。阳性预防pcr出现的假阳性结果是可以通过检测手法来避免的，像是假阳性的结果，一般是会影响到患者的具体治疗

⊙▂⊙ PCR假阴性的原因分析及解决办法假阴性是指不出现特异扩增带。可能原因：引物设计不合理，酶失活或酶量不足，模板量太少，退火温度不合适，循环次数过少，产物未及时电泳检测等。解下面就PCR实验室出现假阳性(核酸污染)的具体原因及应对措施分析如下：一、试验室经常出现核酸气溶胶污染的原因：1. 不合理的实验室建设严格的PCR实验室应有标准的正负压系统及四分

ˇ０ˇ 下面就PCR实验室出现假阳性（核酸污染）的具体原因及应对措施分析如下：一、试验室经常出现核酸气溶胶污染的原因：1.不合理的实验室建设严格的PCR实验室应有标准的正负压系统及四酶失活：需更换新酶，或新旧两种酶同时使用，以分析是否因酶的活性丧失或不够而导致假阴性。需注意的是有时忘加Taq酶或溴乙锭。引物：引物质量、引物的浓度、两条引物的浓度

≡(▔﹏▔)≡ 2、PCR试剂污染：PCR试剂在调配的过程中，有可能被双蒸水、加样枪、容器等污染。3、PCR扩增产物污染：这是一种最常见的污染问题，PCR产物的拷贝量大于1013copy/mL,即使被很少量造成假阴性的原因可以通过设置试验对照来查找。试验对照包括：1、DNA阳性对照：以含有目的片段的DNA(或质粒)作为模板进行扩增，证明PCR试剂是否有效、扩增过程是否正确及待测样