qpcr结果与预期相反,预期成果是什么

qpcr结果与预期相反,预期成果是什么

再来看第二张图，这是同一篇文章的qCPR验证结果。有没有发现点问题呢？框出来的这部分，生信结果和qCPR验证结果是不一致(相反)的(有兴趣的同学可以去看下原文do答：RNA-seq是大规模筛选用的，反应样本整体的基因表达变化趋势，但不能保证每一个基因的变化趋势都与qPCR保持一致。RNA-seq与RT-PCR本身就是两种不同的实验平台

＞＾＜ 用qPCR验证干扰效率，我设计了同个基因的两对引物，但其实序列是一样的，但结果跑出来一对引物的nc比干扰株高，另一对干扰株比nc更高？为啥呢😭赞回应转发赞收藏其实和FAM™、VIC™、SYBR™ Green 类似，ROX™ 也是一种在qPCR 反应中能被qPCR 仪检测到的荧光染料分子。但与其他染料不同，ROX™ 是一种惰性参比染料，也就是说，其荧光信号并不

首先，你需要对qPCR验证吻合率有一个合理预期，这两件事必须十分清楚：1. 测序和qPCR是两种不同的检测方法，出现一定程度的不一致(30~40%左右)是正常的也是合理的[1]。2. 用qPCR验证就是Ct值过大，那么Ct值过大的话，有可能原因就是模板浓度太低，所以我又重新提高了模板的浓度，但是结果反而和预期相反了，那么感觉这就可以排除模板浓度低的原因，其实反而感觉更有可能是存在抑制物的

本人做实验，Western blot的结果和预计的一样，很理想。但在做qpcr时，反复做了三次，三次的结果基本一致，但费解的是所得的趋势竟然和Wetern完全相反，即Western中冰旋一度病理生理学医学生我也遇到同样问题，跑出来结果和数据库预测的不一样，不知道是不是基因本身

1)检查样品对比关系有无搞反；2)用同一批样品来做转录组和QPCR; 3)排除样品污染；比如核糖体污染、真菌样品的排除细菌污染等；4)尽量挑选差异显著的基因，表达量不能太低；5)最好是一起上机分析（一起提完一起逆转）。对于你的结果你可以从以下几个方面分析：1、你分开2次提