WB稀释后的二抗倒多少,wb 封闭液用水配了会怎样

WB稀释后的二抗倒多少,wb 封闭液用水配了会怎样

用约48ml 1mol/L HCL调至pH6.8加水稀释到100ml终体积。过滤后40C保存。这两种缓冲液必须使用Tris碱6.孵育一抗：可以多配一些抗体，全倒进去，大盒子不切膜全放进去，孵育1h后洗膜(用pbs洗膜),洗15-30min后孵育二抗，1h,后洗膜15-20min就可以显影啦！7.显影：显影液现配现用！直接在那个皿

一抗溶液中加入0.2% 叠氮钠后可4 ℃存放至少2周(一个月我也用过，没问题，再长时间还没试六、发光鉴定一般的WB检测过程中，都会有封闭、一抗、二抗和底物显色这8.孵二抗：1:5000稀释，10ul二抗+50ml稀释液(2.5g脱脂奶粉+50mlTBST或者50mlTBST),室温孵育膜2h。9.TBST洗膜3次，10min/次。10.显影成像：将PVDF膜平铺在保鲜膜上，移液器取ECL

建议起始浓度1:200开始(当然你也可以1:100,如果你的背景不高的话),倍比稀释，不是再做1:100-1:1000稀释，注意了。其实没有必要分装，一般都会添加保护剂的。如果你一定要分装，建一般抗体的说明上，都给出了一个范围，一抗为1:200-2000,二抗为1:1000-10000。western blot 的原理：本质是抗原抗体反应。第一抗体就是能和非抗体性抗原(特异性

答：WB一般上样30-100μg不等，结果跟目的蛋白的表达丰度、上样量、一二抗的量以及孵育时间都有关系，也与显色时间长短有关。开始摸条件时，为了拿到阳性结果，各个步骤都可以量多一点时cn113403330a公开了一种改造后的新冠病毒s基因及利用其构建的重组质粒和重组卡介苗及应用。具体的，通过对s基因启动子区域部分序列与终止子区域部分序列进行改造，获得改造后的s蛋白基

答：WB一般上样30-100μg不等，结果跟目的蛋白的表达丰度、上样量、一二抗的量以及孵育时间都有关系，也与显色时间长短有关。开始摸条件时，为了拿到阳性结果，各个步骤都可以量多一点时用时取适量用于二抗稀释。二抗的稀释请参照厂家使用说明。一次WB结束后，可以回收稀释的二抗，4℃保存，以用于下次的WB,通常在1周内可以重复使用2-3次。详细的WB操作可以浏览我