PCR基因,荧光定量pcr原理和步骤

PCR基因,荧光定量pcr原理和步骤

⊙△⊙ PCR作为一个体外酶促反应，其效率和特异性取决于两个方面，一是引物与模板的特异结合，二是聚合酶对引物的有效延伸。引物设计的总原则就是提高扩增的效率和特异即使扩增碱基序列相同，但整体模板不同，也有可能导致PCR扩增效率不同（比如基因组DNA和质粒DNA等）。（1）DNA标准品——通过常规PCR进行目的基因扩增，回收纯化扩增产物优点：易

PCR检测常用基因PCR检测主要用于遗传疾病、感染病及药物敏感性等方面的研究和诊断。常见的PCR检测基因包括Hb基因、EGFR基因、BRCA1/2基因等。其中，Hb基因检测可以用于检测贫血，EGFpcr基因检测是对基因来做检查的一种方法，能够检查出是否出现了遗传性疾病的突变基因。主要是通过抽血的方法来做检查的，通过这种方法检查能够对血液系统进行分析，可以检查出

PCR扩增目标DNA片段。实验原理多聚酶链式反应(polymerase chain reaction, PCR)基本原理类似于DNA的天然复制过程，其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸1. PCR基因检测检测目的基因是否转录通常采用分子杂交的方法。基因表达分为转录及翻译两阶段，转录是以DNA(基因)为模板生成mRNA的过程，翻译是以mRNA为模板生成

*1.原位PCR 原位PCR(in situ PCR)就是在组织细胞里或组织切片上进行PCR反应，它结合了具有细胞定位能力的原位杂交和高度特异敏感的PCR技术的优点，在分子和细胞1971——PCR技术雏形Khorana第一个成功完成基因的合成—丙氨酸tRNA编码基因[2];Kleppe提出体外扩增设想[3]。但由于当时的技术水平有限，并且具有较强稳定性的DNA聚合酶还未被发现，D