三、解决PCR实验室污染的方法 3.1 “人、机、料、法、环”:首先针对上述产生气溶胶污染的原因进行分析,从人员、硬件配置、物料、方法(SOP)、环境五个方面进行认真复盘,整改。这是保...
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菌落pcr假阳性现象及原因 |
为什么pcr容易假阳性,PCR阳性和阴性对照的意义
菌落PCR 很容易出现假阳性,可能与菌落本身的含量过于复杂所导致的1。用载体引物来作一般可以降低假其PCR扩增是不会成功的。二、假阳性出现的PCR扩增条带与目的靶序列条带一致,有时其条带更整齐,亮度更高。引物设计不合适:选择的扩增序列与非目的扩增序列有同源性,因而
可互相拼接,与引物互补后,可扩增出PCR 产物,而导致假阳性的产生,可用巢式PCR 方法来减轻或消除(3)非特异性扩增带:PCR 扩增后出现的条带与预计的大小不一致,或同时出现多个条带,包由于PCR的灵敏度非常高,污染被认为是影响PCR结果的最重要因素之一,会产生假阳性结果。同样关键的是导致假阴性结果的各种来源。如果PCR混合物或扩增反应本身的一个或多个基本部分受
核酸检测在方法学上面没有假阳性,是确定新冠感染的“金标准”。PCR(聚合酶链式反应)是最成熟的核酸检测技术,开展核酸检测需要在PCR基因扩增实验室中完成。但是,王亚伟解释说,PCR实验室出现由于PCR的敏感性和效率特别高,所以少量的扩增产物污染标本或反应管即可出现假阳性。尤其是PCR扩增产物和质粒分子很容易造成实验室的污染,导致假阳性现象发生。1、规范实验室
PCR反应出现假阳性结果原因1 ) 引物设计不合适:选择的扩增序列与非目的扩增序列有同源性,因而,在进行PCR扩增时,扩增出的PCR产物为非目的性的序列。靶序列太容易发生非特异性扩增和假阳性结果。检测耗时长,操作繁琐。只能做定性检测。荧光定量PCR技术荧光定量PCR
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标签: PCR阳性和阴性对照的意义
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