转化后长菌全是假阳性,菌落PCR的原理

转化后长菌全是假阳性,菌落PCR的原理

新冠核酸实验室污染假阳性的表现多为：假阳性的渐进式、散发式、突发式增多，同时更多的案例表现为阴性对照出现阳性荧光信号(扩增曲线),因此该新冠核酸实验室极大可能已被污染。据报DH5α获得的质粒不应该那么少才对啊~看看会不会是培养的菌浓度过高，细胞裂解不充分造成的。连接的问题：1. 看看是不是质粒自连：作连接体系的时候，作阴性对照

⊙﹏⊙‖∣° 2重组质粒转化大肠杆菌，几乎全是假阳性.挑了26个菌做菌落PCR只有3个阳性克隆.为什么假阳性那么多呢？会不会是感受态在-70度放得时间长了，不好用了.还是没有酶切好？用的是BamH 目的基因可能没切下来

●△● 我转化大肠以后也长菌，为啥菌落PCR就P不出条带。发布于2022-07-10 15:09 狐说狸有理一起来分享给朋友们看看吧：笔记评论没想好起什么名字07-16 回复应该建议重新以菌落为模板进行PCR检测，再重新以菌液为模板进行PCR检测，因为菌落或者菌液PCR假阳性的几率还是比较高的。但如果还是出现以上结果，推测很可能是平板上

小木虫，论坛，科研回头想想：酶切、电泳、回收、连接、转化、筛选，这几步最容易出现问题的就是酶切和感受态细菌。在这些